Práctica 8: TINCIÓN WIRTZ-CONKLIN

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Fundamento
Para la tinción de endoesporas bacterianas se requieren tinciones por calor para favorecer la penetración de los colorantes. Las esporas adquieren color verde, mientras que las formas vegetativas se ven rojas.

Objetivo
La visualización de endoesporas teñidas por calor.

Material y Reactivos
Verde malaquita, safranina, alcohol, torunda, asa de siembra de platino, portas, H2O destilada, suero fisiológico, mechero Bunsen, bacterias AAR1 y AAR2 y rejilla.

Protocolo
1. Preparamos el material.
2. Esterilizamos el asa de siembra con la llama y enfriamos tocando en una zona donde no haya cultivo.
3. La muestra se toma de arriba abajo del tubo y extendemos el asa con la muestra y una gota de SSF en un porta.
4. Fijamos por calor la extensión, sin dejarlo mucho tiempo para que el porta no se rompa.
5. Colocamos el porta en una rejilla y lo cubrimos con colorante verde malaquita.
6. Calentar el porta por debajo con una torunda con alcohol, 5 min.
7. Lavar con H2O destilada y escurrir.
8. Cubrir el porta con colorante safranina, 2 min.
9. Lavar el porta con H2O destilada y dejar secar.
10. Observamos en el microscopio.   
 AAR1: endoesporas bacterianas 

 AAR2: endoesporas bacterianas
                                                     

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