Práctica 10: ANTIBIOGRAMA

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Fundamento
Las técnicas de antibiograma son las utilizadas en el laboratorio de microbiología para estudiar la actividad de los antimicrobianos frente a los microorganismos responsables de las infecciones.

Objetivo
El objetivo es el de medir la sensibilidad de una cepa bacteriana y seguir la evolución de las resistencias bacterianas.

Material y Reactivos
Tubos de ensayo, asa de siembra de platino, vasos de precipitado, mechero Bunsen, micropipeta, placa Petri con medio de cultivo, asa Drigalsky, pinzas, discos de antibióticos, SSF, bacterias 3 y 7, alcohol, 0’5 Mcfarland y gradilla.

Protocolo
1. Cogemos 2 tubos de ensayo y ponemos 5ml de SSF en cada uno.
2. Con un asa de siembra la esterilizamos con el mechero y tomamos una muestra de las bacterias 3 y 7.
3. Inoculamos la muestra en los tubos de ensayo con el SSF, haciendo una suspensión bacteriana.
4. Disgregamos con el mismo asa la muestra, hasta que coja un tono de turbidez como el 0’5 (aprox.), comparándolo en un fondo oscuro.
5. A continuación, con una micropipeta cogemos 100µl de la suspensión y lo depositamos en el centro de una placa Petri rotulada con medio de cultivo.
6. Introducimos un asa Drigalsky en alcohol y la pasamos por la llama y extendemos la muestra por toda la superficie de la placa.
                        
7. Cogemos unas pinzas de platino, las pasamos por alcohol y después por la llama. Tomamos con las pinzas un disco de antibiótico y lo depositamos en la placa.
8. Incubamos en la estufa 18 horas.

Resultados e Interpretación
- Medir el radio del halo creado por el antibiótico y calculamos el diámetro. Dependiendo de la medida decimos si es resistente o sensible a ese antibiótico.
Antibióticos utilizados  
CIP5        Ciprofloxacin 
CEC30  Cefaclor
CD2  Clindamycina
CZ30  Cefazolin

Bacteria 7: CIP5  30mm. Sensible                    Bacteria 3: CIP5  30mm. Sensible
                  CD2  30mm. Sensible                                        CD2  Resistente
                  CEC30  Resistente                                             CEC30  Resistente

                  CZ30 Resistente                                                CZ30 Resistente

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