Práctica 16: IMVIC

INDOL

Fundamento

La triptofanasa degrada el triptófano y se libera indol y para ver si la bacteria es capaz de degradar la triptofanasa se usa el reactivo de Kovac, que reacciona con el indol formando un compuesto de color rosa.

Objetivo

Para ver si la bacteria produce triptofanasa y como resultado indol.

Material y Reactivos

Reactivo de Kovac, bacterias 3 y 7, un tubo con agua peptona y asa de siembra de platino.

Procedimiento

1. Inocular con un asa de platino una colonia en el agua peptona.

2. Añadir 5 gotas de reactivo Kovac al tubo.

3. Frotar con las manos el tubo para que se mezcle.

Resultados e Interpretación

- Si se forma una banda rosa en la superficie es + y es capaz de degradar triptófano.

- Si se forma una banda amarilla en la superficie es – y no es capaz de degradar triptófano.

(Negativo)

ROJO METILO

Fundamento

Se realiza para determinar la capacidad de una bacteria de fermentar la glucosa por la vía ácido mixta, con producción de ácido. Para detectar si se han producido esos ácidos se emplea un indicador de Ph (rojo metilo).

Objetivo

Comprobar si la bacteria produce fermentación de la glucosa por la vía ácido mixta.

Material y Reactivos

Rojo metilo, tubo con medio RMVP, bacterias 3 y 7, asa de siembra de platino y mechero Bunsen.

Procedimiento

1. Suspender el inóculo en el medio RMVP mezclar.

2. Al tubo añadimos 5 gotas de solución rojo metilo.

Resultados e Interpretación

- Color rojizo, es + a la fermentación.

- Color amarillo, es – a la fermentación.

(Negativo)

VOGES-PROSKAUER

Fundamento

Esta prueba se realiza para determinar la capacidad de una bacteria de fermentar la glucosa por vía butanodiólica.

Objetivo

Comprobar si la bacteria fermenta glucosa por la vía butanodiólica.

Material y Reactivos

Tubo con medio RMVP sembrado, asa de siembra de platino, mechero Bunsen, reactivo α-naftol (VPB), reactivo KOH (VPA) y bacterias 3 y 7.

Procedimiento

1. Suspender un inóculo en el medio RMVP y mezclar.

2. En el tubo añadimos 12 gotas de α-naftol (VPB) y 4 gotas de KOH (VPA).

 

  

3. Agitamos el tubo y lo dejamos abierto e inclinado 5 min.

Resultados e Interpretación

- Medio de color rosado, es + y fermenta.

- Medio de color amarillo, es – y no fermenta.

(Negativo)

CITRATO

Fundamento

Esta prueba valora si la bacteria es capaz de utilizar el citrato como única fuente de carbono y compuestos amoniacales como única fuente de nitrógeno en su metabolismo. Este agar contiene citrato de sodio y azul de bromotimol como indicador de Ph.

Objetivo

Comprobar si la bacteria puede usar el citrato como única fuente de carbono.

Material y Reactivos

Tubo con medio de citrato, asa de siembra de platino, bacterias 3 y 7 y mechero Bunsen.

Procedimiento

1. Realizar una siembra por agotamiento en la superficie del agar inclinado de citrato.

Resultados e Interpretación

- Color azul intenso es +

- Sin cambio de color es -

(Negativo)