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Mostrando entradas de diciembre, 2017

Práctica 8: TINCIÓN WIRTZ-CONKLIN

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Fundamento Para la tinción de endoesporas bacterianas se requieren tinciones por calor para favorecer la penetración de los colorantes. Las esporas adquieren color verde, mientras que las formas vegetativas se ven rojas. Objetivo La visualización de endoesporas teñidas por calor. Material y Reactivos Verde malaquita, safranina, alcohol, torunda, asa de siembra de platino, portas, H2O destilada, suero fisiológico, mechero Bunsen, bacterias AAR1 y AAR2 y rejilla. Protocolo 1. Preparamos el material. 2. Esterilizamos el asa de siembra con la llama y enfriamos tocando en una zona donde no haya cultivo. 3. La muestra se toma de arriba abajo del tubo y extendemos el asa con la muestra y una gota de SSF en un porta. 4. Fijamos por calor la extensión, sin dejarlo mucho tiempo para que el porta no se rompa. 5. Colocamos el porta en una rejilla y lo cubrimos con colorante verde malaquita. 6. Calentar el porta por debajo con una torunda con alcohol, 5 min. 7. Lavar ...

Práctica 7: TINCIÓN ZIEHL-NEELSEN

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Fundamento La tinción Ziehl-Neelsen consta de tres fases: 1. Una tinción en caliente con un colorante básico, para que todas las bacterias se tiñan de rojo. 2. Decoloración en frío con una mezcla ácido-alcohol, el cual arrastra el colorante inicial y las decolora. De modo que las BAAR permanecen teñidas de rojo y el resto de las bacterias incoloras. 3. Coloración de contraste con azul de metileno, de manera que las BAAR permanecen rojas y el resto de las bacterias de azul. Objetivo Identificar si la bacteria será ácido-alcohol resistente (rojo) o no (azul). Material y Reactivos Fucsina fenicada, azul de metileno, alcohol-clorhídrico, H2O destilada, portas, mechero Bunsen, asa de siembra de platino, suero fisiológico, bacterias 3 y 7, torunda, alcohol y rejilla. Protocolo 1. Preparamos el material. 2. Esterilizamos el asa de siembra con la llama y enfriamos tocando en una zona donde no haya cultivo. 3. La muestra se toma de arriba abajo del tubo y extendem...

Práctica 6: TINCIÓN DE GRAM

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Fundamento La tinción de Gram se desarrolla en tres fases: 1. Tinción con un colorante catiónico, que se una a la pared bacteriana y se estabilice con ayuda de un mordiente (lugol). 2. Decoloración con alcohol/acetona  que disuelva la membrana externa de las bacterias gramnegativas y no de las grampositivas, debido a su grosor y menor contenido lipídico. 3. Coloración de contraste que tiña la pared de las gramnegativas de rojo, y las grampositivas azules, con el primer colorante. Objetivo Identificar si la bacteria es grampositiva (azul) o gramnegativa (rojo). Material y Reactivos Safranina, cristal violeta, lugol, H2O, alcohol-acetona, portas, puente de tinción, bacterias 3 y 7, asa de siembra platino, suero fisiológico, mechero Bunsen y pipetas Pasteur. Protocolo 1. Preparamos el material. 2. Esterilizamos el asa de siembra con la llama y enfriamos tocando en una zona donde no haya cultivo. 3. La muestra se toma de arriba abajo del tubo y extendemos...